周记标题范文

导语：怎么才干写好一篇周记标题，这就需求收集收拾更多的资料和文献，欢迎阅览由好用生活网收拾的十篇范文，供你学习。

篇1

周记：用文字记载一周来自己的思维、学习、生活状况进行的每周一次文字记载。

周记格式：

1、 日期、气候。

2、本周记事 。

3、自评 。

4、处理办法 。

5、下周方案 。

篇2

Abstract： In the construction process of the project， in order to improve economic benefit， it is necessary to strengthen the management of the material. The paper elaborates the configuration， use， assessment， recovery and other aspects of reusable materials， and proposes the corresponding recommendations， to provide a reference for the construction business.

关键词： 资料处理；经济效益；主张

Key words： materials management；economic benefit；suggestions

中图分类号：TU71 文献标识码：A 文章编号：1006-4311,201415-0114-02

0 导言

周转资料是工程施工出产不行短少且用量较大的辅资料，经核算，现在工程项目周转资料的摊销额占到完结产量的12%，按一个工程公司年完结施工产量50亿元计，耗费周转资料在6亿元左右。周转资料投入过大，是导致工程项目赢利下降的要素之一。修建企业在施工进程中应从收购、保管、运用和收回等各环节切实加强现场周转资料处理，下降收购和运用本钱，才干进一步进步工程项目经济效益。

构成周转资料投入过大的原因：一是部分项目周转资料的置办方案没有与工程施工安排规划有机地结合起来，按运用时刻核算最优批量，收购、租借随意性大，构成糟蹋现象严峻；二是运用进程中处理失控，现场无专职或兼职的资料处理人员监管，台账不健全；关照办法不到位，未定时或不定时盘查现场运用状况，对构成丢掉、损坏资料的运用单位未及时按规则进行处理；三是周转资料离场、整修、改造作业不能满意全体分配要求，运用率不高。

1 工程开工前，要结合施工安排规划，定好周转资料的置办、运用方案

工程项目上场后，工程部要编制具体的施工安排规划方案，一同结合工点开工数量、施工时刻、劳力和设备投入等状况，编制周转资料的置办及运用处理操控方案。项目物资部应在工程部的帮忙下编制周转资料收购或租借方案。先由工程部核算出悉数周转资料的需用量，再根据工期及施工安排承认每节点的运用量、运用时刻和周转次数；物资部据此编制周转资料的置办方案，再按商场调查的收购价格、租借价格进行本钱测算剖析，抉择装备办法。物资部在施行收购前应向工程部进行再次承认，在施工方案有变时根据实践状况编制新的置办、运用方案。只要按实践施工状况编制置办方案，合理安排进料时刻，才干保证现场需求，从收购源头上避免周转资料糟蹋，有用操控工程本钱。

2 工程施工中，现场要配齐人员，树立查核台账，严管严控，完成奖罚

有的项目在周转资料运用处理方面存在以下问题： 一是架子队没有装备专职物资处理人员，资料进入施工现场后无人处理，与运用单位的工费也未真实挂钩，劳务队随意运用，糟蹋严峻；二是对周转资料的置办办法未进行费用测算，或施工方案改动时未及时调整，有的运用时刻较长，应进行购买的周转资料选用了租借的办法，导致租借费用过高，且丢掉的资料按原价补偿，两项费用乃至远远高于购买价；三是没有树立现场处理台账，有的即便树立了台账也形同虚设，未按月盘点，进程管控不到位，处理人员未实时把握周转资料运用状况，在进行查核时也未真实完成奖罚并对相关责任人进行处理，及时遏止糟蹋现象，致使周转资料运用人不担任任，项目处理层也不能及时发现存在的问题，工地竣工时才发现资料丢掉巨大，而劳务队工费大部分已结算，远远不足以抵扣，单位亏本已成定局；四是现场关照不力，导致周转资料丢掉严峻。

要管好周转资料，必须加强现场处理，具体要做到以下几点：

2.1 周转资料进出场要做到程序合理，手续完善。周转资料量大、调集频频，要管好用好它，必须按资料出场、领用、分配、离场的流程进行严厉的进程监控。首要要树立健全《现场周转资料处理台账》；资料参加时应由项目物资部人员、现场资料员、保管员或现场看守人员一同清点到货数量，检验合格后，处理交代手续，交由保管员或看守人员看守；发放时，应严厉按照领用准则交与施工班组，并由领料人签字承认；现场资料分配要做到手续完善，实时更新现场台账，并及时向项目物资部报告。

2.2 加强周转资料运用本钱查核，明晰责任，根绝丢掉糟蹋。各项目现有的承揽方式中，劳务队都是无偿运用周转资料的，而对周转资料损坏丢掉的处理又未落到实处。劳务队用而不论，资料丢掉状况严峻；加之运用进程中调集频频，手续不全，终究成了一笔糊涂账。要强化周转资料运用本钱查核作业，对作为周转资料运用的型材、钢管等资料合理进行账务处理，根据运用状况分次或分期摊销，不能一次性列入工程本钱。

2.3 加强现场资料安全维护办法。可分三班24小时关照，并在施工现场周围装置监控和红外线防盗系统，对值勤看守人员进行监管。对进出资料贮存、施工区域的人员、车辆进行逐个挂号和查看，特别是出场的资料要澄清去向，看守人员对有移送手续的车辆和人员才干放行，最大程度地削减资料丢掉现象。

2.4 完善资料租借合同和劳务合同中周转资料丢掉损坏补偿的具体办法。拟定周转资料装备方案时，对运用期短的选用租借办法，签定周转资料租借合一同应对运用期做规则，明晰当租借时刻超出某一期限后，租借资料即变为购买资料，以防工期延伸导致租借费用超出购买费用，给单位带来不必要的丢掉。

3 工程完毕后，要加强对周转资料的收回、整修和分配，进步周转资料运用率

①周转资料运用完毕后，项目物资部要安排周转资料有序离场，对其进行整修，铲除外表附着物，并核对现场周转资料与台账数量是否共同，丢掉的数量要查明原因，按规则对运用责任人进行处理。②暂时调不出的资料，需从头转场寄存时，应对拟转场的资料进行编号，编制转运流程，保证转、运、存各个环节有序进行。③贮存期间要进行防锈处理，合理寄存，并树立待分配资料台账，由专人进行处理，物资部定时对库存资料进行查看。④严厉执行公司周转资料作废的有关规则，凡作废的周转资料需公司同意后按照周转资料处置流程施行，由公司派人或托付项目处理，报批时应对作废处置原因、当地商场状况、估计处置价格做具体的状况阐明。⑤坚持对周转资料进行小改小革作业。各项目要安排人员对经过小处理就能运用的周转资料，进行再加工，进步周转资料的运用率。

4 加强周转资料处理的一点领会

作为物资处理部门，咱们一向高度重视周转资料处理作业，并将不断探求周转资料处理的新思路、新办法，强化周转资料置办、运用、维护、评价、收回、调拨等重要环节的进程管控，充分调集施工一线的处理积极性。主张股份公司、集团公司及各工程公司按区域树立相应的周转资料储藏、加工、租借公司，各项目离场后暂时调不出的搁置周转资料经过评价折价上交公司，由储藏、加工、租借公司保管，并按评价价冲抵项目上交。一方面临搁置周转资料进行合理保管、维护，增加其运用寿命和周期，削减新项目置办本钱；另一方面，经过信息渠道，展开对外事务，拓宽企业盈余空间。周转资料处理的好坏，是项目盈亏与否的关键要素之一。周转资料的处理不是一件简略的事，而是一项系统的处理工程，它反映了项目处理精细化的程度，相关于直接性的耗费资料的处理，更表现了它的“非直接性”，即不行能经过限额发料的办法来调控，因而要根据施工方案拟定周转资料置办、运用方案，做好收购或租借、出场、现场运用及离场等各个环节的作业，用最少的资金抵达运用率最大，然后完成企业赢利的进步。

参考文献：

[1]胡晓斌.修建企业资料处理浅述[J].中小企业处理与科技,下旬刊，2010,12.

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关键词：鳞翅目 幼虫 味觉受体基因

中图分类号：Q969 文献标识码：A 文章编号：1672-3791,201211,c-0154-01

自从十几年前克隆了嗅觉受体后，人们关于昆虫嗅觉机理的知道前进了一大步。昆虫的嗅觉编码起始于气味分子进入嗅觉感触器，与气味结合蛋白,odor binding protein，OBP相结合，然后被运送到嗅觉感触细胞的受点，激活G偶联蛋白，经过一系列的细胞内反响，构成一个动作电位的开释。昆虫对不同气味的信息编码，是经过整个嗅觉神经通道中各级神经元不同散布方式的活化来完成的。经过在各级嗅觉神经元上的分子图画，昆虫可对气味分子作出辨认，并由此而发生不同的行为反响。相关于嗅觉而言，人们对昆虫味觉机理的研讨和了解就相对落后了。本文将对昆虫味觉受体基因的研讨作一总述。

1 昆虫味觉受体电位的特征

一般以为，与嗅觉感触细胞相同，在味觉感触细胞的树突上也存在许多受点。味觉影响物经过与受点的结合，也能激起一个受体电位，并终究导致一个动作电位的开释。所不同的是，味觉感触器中并没有发现味觉结合蛋白，所以很或许味觉影响物是直接与味觉受体结合的。因为味觉化学物质大多是一些低分子量的物质，如氨基酸，简略糖类，矿物质盐类，各种植物次生性化合物等。他们在水中的溶解度比较高，能够直接抵达受点。

味觉受体电位的发生机制，在脊椎动物中的研讨标明，味觉传导机制与嗅觉传导机制相同，涉及到第二信使如Camp、IP3以及K+、Ca2+等离子通道。Donald等,2002以为，味觉反响的发生不仅是从味觉受体细胞中接收到的信息的传递，而且是一个全体性的联通网络信息整合的成果，它的发生有一个聚合和涣散的进程[1]。

2 昆虫味觉受体基因的发现

近年来，许多科学家运用果蝇Drosophila作为研讨模板，对昆虫的味觉进行了研讨，使人们对味觉机理有了更深化的知道。起始于2000年由Clyne等的研讨作业，发现了一个基因宗族，以为或许编码味觉受体。这个新的基因宗族被命名为味觉受体基因宗族,Grs[2]。这些基因编码的蛋白具有穿膜七次的结构域，这与G蛋白偶联受体,GPCR的结构方式是相同的。这好像意味着G蛋白偶联受体参加了昆虫的味觉传导进程。G蛋白偶联受体参加了许多其他信号途径的调理和传导。例如哺乳动物和果蝇的视紫红素在视觉传导中的效果。还有哺乳动物的味觉传导进程等[3]。2001年，Scott等和Dunipace等接着承认了此宗族的新成员，使此宗族成员数扩展到了54个和56个。发现它们在味觉神经元中表达，这些神经元投射到果蝇大脑的味觉中心—— SOG。与嗅觉系统相似，每种味觉受体都在一小部分味觉神经元中表达，每个味觉细胞或许只表达一种受体。到现在为止，现已发现了此宗族的60个基因编码了68种味觉蛋白,gustatory protein[4]。这些基因散布在果蝇基因组的各个部分，但一般沿着相对保存的内含子的方位摆放。近年来，又在冈比亚按蚊Anopheles gambiae中判定了一个编码76个味觉蛋白的味觉受体基因宗族,AgGr genes。经过与果蝇的味觉受体基因宗族比较发现，昆虫味觉受体基因宗族来历相同，可是在不同的种上的确存在不同的进化趋势[5]。

3 味觉受体基因的表达研讨

味觉基因的表达研讨最早选用RT-PCR的剖析手法来剖析味觉安排，随后选用原位杂交,in situ hybridization技能和报告基因表达,reporter gene expression技能结合的办法来进行研讨[6]。Gr-GAL4构建的报告基因驱动表达是一种常用的办法。研讨标明，味觉受体基因一般表达在味觉神经元的亚基上面。在功用研讨方面，值得一提的是，用基因敲除的办法，近年来发现果蝇味觉受体基因宗族中的两个基因，Gr5a和Gr66a，别离编码了对糖类灵敏的味觉蛋白宗族和对取食按捺素灵敏的味觉蛋白宗族[6]。特别是Gr5a，表达的蛋白便是海藻糖,trehalose的味觉受体蛋白[7]。这也是现在仅有一个被准确判定了配体的味觉受体蛋白。Gr5a表达的味觉蛋白能结合海藻糖，然后在行为上激起果蝇的取食反响。Gr66a表达的味觉蛋白能与多种取食按捺素相结合，然后在行为上激起果蝇的趋避反响。对果蝇而言，Gr基因都表达在其化学感触器中，绝大多数都表达在味觉神经元中，但也有少量在嗅觉神经元中表达，因而有些研讨者以为某些Gr基因或许及参加了味觉辨认也对嗅觉辨认起到了必定的效果[8]。当把表达Gr21a基因的味觉神经元去掉后，果蝇就失去了对CO2的趋避才能，可是，现在还不清楚对CO2的勘探的确是经过味觉神经系统来进行的[9]。

4 结语

总而言之，现在关于味觉受体基因的研讨并不多，许多昆虫特异性的味觉受体基因还在探求傍边。可是味觉受体基因的研讨能够从根本上提醒昆虫味觉行为的机制，为防治农业病虫害供给强有力的理论根据。因而，将来在这方面的研讨值得大力投入。

参考文献

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[6] Wang Z，Singhvi A，Kong P and Scott K.Taste representations in the Drosophila brain.Cell 2004,117：981-991.

[7] Dahanukar A，Hallem EA and Carlson JR.Insect chemoreception.Curr.Opin. in Neuro，2005,15：423-430.

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2011 年4 月7 日晚，欧央行宣告加息25 个基点，是欧央行自2008 年金融危机以来的初次加息。

尽管兴旺经济体的复苏晚于新式经济体，但从最新的状况来看，G7 除了日本以外，都出现出较强的增加态势，而且经济增加从各方面来看可保持性较强。

在经济增速逐步趋近正常水平之外，兴旺经济体的通货膨胀水平开端敏捷上升。欧元区最新的CPI 通胀现已高于欧央行以为的挨近2%的合理水平，而PPI 的增速显得更高。最新发布的欧元区2 月份的PPI 同比涨幅现已高达6.6%的水平。这是欧洲央行抉择加息的经济根本面。

当然，美国经济的复苏显得愈加微弱，但美联储在近期加息的目的并不强。所以，欧央行加息除了考虑经济根本面，削减购买债款危机国家的国债本钱，欧央行内部的政治性原因都或许起到了一些效果。

不管欧央行加息的首要原因是什么，这一方针的宣告打响了兴旺经济体退出影响性经济方针的榜首枪，兴旺经济体的微观经济方针由影响转向中性方向的进程自此正式拉开了前奏。此次转机会给全球经济、财物商场和大宗产品价格发生许多深远的影响。

欧洲央行加息的含义和影响

尽管全球经济短期内遭到日本地震、核走漏危机和利比亚危机等负面要素的影响，可是此次欧央行的加息实践上承认了全球经济处在进一步康复的进程中。估计未来跟着全球经济的进一步康复，包含美联储、英格兰央行等在内的首要央行也会参加到加息的进程来。

咱们对欧洲央行加息影响的判别如下：

,1欧央行的加息，以及美联储QE2 的完毕，或许会对兴旺经济体金融商场的估值构成必定的按捺。而本钱回流对部分新式经济体的财物泡沫构成压力。

,2未来1-2 年，尽管美国经济复苏或许较为稳健，但美元汇率或许继续处于弱势之中，这将导致人民币存在较大的增值压力。

,3在全球经济复苏、美元弱势和中东危机没有完毕的条件下，全球大宗产品商场或许继续坚持强势。

加息将按捺全球金融商场

兴旺经济体的稳健复苏和继续加息，将进步整个经济的利率水平，然后拉低金融商场的估值。假如全球经济在未来2-3 年的时刻里出现比较微弱的复苏，那么央行终究加息的脚步或许对首要兴旺国家的财物价格构成偏负面的影响。

从前史阅历来看，美国在1999-2001 年前后的加息则拆穿了科技网络泡沫，而2004-2007 年的那一轮加息刺穿了美国的房地产泡沫。

从全球本钱活动来看，首要兴旺经济体的继续加息或许会强化本钱从新式商场撤出、并流入兴旺国家的趋势，在此期间，一些的新式经济体的财物价格或许会遭到显着的按捺。

尽管这个问题提出或许有些早，但这一危险值得注意。从前史阅历来看，全球本钱的回流和美元汇率的增值往往会引发危机，比方说，在曩昔30 年，美元汇率出现过两波显着的增值。但在1979-1985 年的美元汇率的增值进程中，爆发了拉美债款危机；在1995-2002 年的美元增值进程中，爆发了俄罗斯债款危机和阿根廷危机。一同，在1995-2002 年这长达七八年的进程中，新式商场全体的指数水平处在震动下行的进程中。

从现在来看，未来1-2 年，美元汇率或许仍处在相对弱势的格式；可是假如终究美国实体经济康复比较微弱，出资回报率比较高，那么美元汇率彻底或许回转并出现显着的增值，就像美元在1995 年的回转那样。在这一进程中，一些微观脆弱性比较高的新式商场或许会遭到比较大的冲击。

美元汇率中期处于继续弱势

近来，美元指数下探到75 的水平，挨近两年之内的最低点，许多剖析将之归结于欧元区的首要加息。但从愈加长时刻的美元汇率动摇来看，至少在最近1年多的时刻里来看，美元在趋势上震动走低。而且，假如咱们剔除去通货膨胀的要素后，美元的实践有用汇率乃至现已创下了近十年来的新低。

上面的现实显现，或许欧元相对激烈的加息预期并不是影响中期美元汇率动摇的首要力气。实践上，假如咱们调查曩昔10 年的欧元区对美国的息差改动和美元汇率的走势，能够看到两者之间好像并没有明晰的联系。

从咱们对曩昔40 年美元汇率的前史调查来看，美元的中长时刻趋势首要取决于两个要素：经济体回报率的系统性改动，和信誉发明的多寡。而从美国近来的一系列的经济数据展开好像暗示，曩昔1 年多来美元汇率趋势性价值下降的首要原因，或许是美国金融系统信誉发明才能正在康复的进程中。

从前史阅历来看，在经济康复的前期，如1992-1995 年，此刻信誉发明的康复较实体经济需求的回升来的更快，在此状况下美元汇率保持了弱势震动的局势。这或许意味着在未来1-2 年，尽管包含联储在内的首要中央银行或许会先后出现加息的抉择，美元汇率或许仍然会处在相对弱势的格式。

在美元弱势的布景下，估计人民币汇率在未来1-2 年会接受较大的压力。

全球大宗产品将保持强势

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在一周的实地调查中，课题组发现遗址地点的大塘坪乡和铁河乡境内各类树木地步散布极为广泛，从课题组地点地动身，沿途城市的钢筋水泥逐步为生机盎然的绿色所代替，沿途区域的城市化和工业化的水平不高，所以课题组以为若是能充分运用两地的较为原始未受工业化及城市化侵袭这一天然优势用于遗址的维护开发，既能使开发建造的本钱下降又能最大的开宣布遗址的经济潜力，一同还不会损坏当地生态环境，走可继续绿色展开的开发路途；而且，铁河乡紧邻鄱阳湖生态维护区这一优胜的旅行资源，若是能将海昏侯墓遗址的开发与鄱阳湖生态景区连城全体，建造为主打“生态游、文明游”的旅行观光胜地，必能谋福当地居民，一同也为南昌为江西增加一张特征手刺。因而，课题组在研讨比照国内外各大遗址的维护方式之后以为遗址公园的方式较为合适海昏侯墓遗址的开发运用，将海昏侯墓遗址建构成南昌的后花园，充分运用当地的生态环境，既不使当地堕入每当开发必损坏生态的怪圈，一同在维护原有生态条件的根底上又极大的发挥海昏侯古墓遗址的经济价值，协助当地居民进步生活水平。

为协助海昏侯墓遗址的维护与开发，课题组的进程是调查国内外各大遗址的维护和开发方式，期望能从中找到对海昏侯墓开发有学习效果的信息。课题组经过对文献的查找收集，最早调查的是意大利的遗址维护的方式；意大利在遗址维护和运用方面现已构成了其共同的方式，即公共部门担任维护文明遗址，私家和企业经营处理和运用这些资源。意大利政府以为，文明遗址联系到民族特质，是国家魅力和竞争力的重要要素，因而把维护、开发和运用文明遗址定为长时刻国策，并作为培育和处理现代文明商场的指导性纲要。政府、彩票和企业是文物维护和修正资金的来历。课题组以为“意大利方式”值得学习之处在于国家对遗址的会集处理，经过树立专门的公共部门来担任文明遗址的处理。但意大利的遗址维护方式不能照搬，因为我国的商场经济没有展开老练，相关立法没有完善，若是轻率引进私家和企业进入，不完善的法令环境和商场环境必定构成处理的紊乱和无序，对遗址本身而言也不是最好的维护方式，因而，照搬“意大利方式”不必定能到达意大利所抵达的效果。

这以后，课题组调查的是美国对遗址的维护与开发，课题组经过对文献的收集总结发现，美国前史文明遗产维护的一个显着特征便是把自然遗产与前史遗产交融在一同，从一开端就树立起建造招供旅行的生态公园的理念。如最早树立的黄石公园，是国际上最大的国家公园，其间有茂盛的森林，飞跃的河流，喷吐的火山，奔驰的野兽，但也保留了美国最早的土著居民――印第安人的聚居地。一同，美国重视用法令的手法维护前史文明遗产。从开端的仅限于维护国有土地上的独立战争纪念物、南北战争的战场遗址等政府所具有的前史文明遗产，到私家具有的前史文明遗产，都逐步列入了法令维护的规模。课题组以为“美国方式”的值得学习之处在于法令的强化和健全。因为海昏侯墓遗址离城市区较远，接近经济较为落后的乡村区域，周边居民的文明遗产维护意识较为单薄，若是不完善相关法令法规，必定影响遗址维护作业的展开。一同“美国方式”有其特殊性，是美国国情下的产品，因而对我国而言并非能彻底适用，所以与“意大利方式”相同，咱们不能照搬“美国方式”而是汲取其间的老练阅历然后协助海昏侯墓遗址的维护与开发找到合适本身的办法与方式。

课题组还对国内提出的许多方式进行了调查，关于全体维护与运用首要有以下三种方式：一是将整个遗址区建成遗址公园，二是将遗址区与风景区结合，建成旅行景区，三是将整个遗址区建成森林公园。在调查之后课题组以为，遗址公园的方式较为合适作为海昏侯墓遗址的维护开发的根本结构。因为海昏侯墓遗址的特殊性，其维护开发也存在有特殊性。海昏侯墓遗址地点地归于乡村，环境相对城市而言更为优胜，但经济的落后使得当地的根底设施极端不完善，而且两地境内没有较为闻名的旅行景区以及风景区，因而将遗址与风景区相结合的方式显着无法完成；一同，将森林公园的维护方式尽管能够完成，可是并不能展现出海昏侯墓遗址的内在文明价值，作为我国现在发现的面积最大、保存最好、内在最丰厚的汉代侯国遗址，将其建构成森林公园无异于对这一文明遗产的亵渎。以海昏侯墓遗址为中心的大遗址地点地经济落后，这是无法否定的现实，但咱们也应该看到正是经济的落后才有了得天独厚的自然环境的优势，这正是遗址公园建造的根底条件地点，建造遗址公园既不会对环境和生态构成损坏又能有用的维护和开发海昏侯墓遗址，一同还能带动周边区域的经济展开，实为一举多得的行动。

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关键词：SolidWorksSimulation；有限元剖析；深沟球轴承；疲惫剖析

导言

SolidWorks是美国Solidworks公司推出一款三维机械规划软件，因为其性能优胜、简略有用而成为三维机械规划的干流软件之一。Simulation是集成在SolidWorks软件中的用于有限元剖析的插件。深沟球轴承在机械行业中运用非常广泛，根本都是由外圈、坚持架、翻滚体、内圈四个部分组成[1]。深沟球轴承的规划极端杂乱，传统的办法早就不能抵达现代机械行业展开的要求。运用SolidWorksSimulation插件对轴承进行规划剖析，能够极大缩短规划周期，进步功率[2]。

1 深沟球轴承三维模型的树立

1.1 轴承参数及作业环境

因为作业需求，电机轴上选用型号为00系列16001的深沟球轴承，其参数如表1。轴承接受径向载荷为400N，轴向载荷为300N，转速180r/min，作业环境温度为80℃。

表1 00系列16001轴承参数

1.2 树立轴承模型

树立轴承模型调用规范库或根据参数自行建模，因为SolidWorks中含有规范轴承库，剖析模型直接调用。单击“东西”菜单，并发动Toolbox。Toolbox是SolidWorks的规范零件库插件，含有轴承、螺钉等各种规范零件，给规划和仿真带来了极大的便当。直接从库中刺进型号为16001深沟球轴承的规范模型，如图1。

2 仿真剖析

三维模型建成后，用SolidWorksSimulation对深沟球轴承三维模型进行应力、应变、位移和疲惫剖析。

2.1 创立算例并指使资料

发动Simulation插件，点击“算例参谋”并创立一个“新算例”，单击“静态剖析类型”。绝大多数轴承的原料都是高碳铬轴承钢，固在“运用资料”中找到并挑选“GCr15”，并输入屈从强度为518420000N/m2[3]，挑选“运用”并封闭选项卡。

2.2 束缚条件和载荷

在“夹具参谋”菜单中挑选“固定几何体”，并挑选轴承外圈外外表为束缚面[4]。深沟球轴承中受力触摸为点触摸，每有一个翻滚体经过，受力点接受一次相同的载荷，这种载荷为轴承载荷。故在“外部载荷参谋”菜单中单击“轴承载荷”，效果区挑选内圈内外表，坐标系挑选“坐标系1”，输入核算载荷值786.280N[5]，并挑选正弦散布。束缚条件和载荷如图2。

2.3 网格区分与求解

在“运转”菜单中，单击“区分网格”[6]。本例选用三角形网格[7]，单元总数为11956个，网格区分如图3。

2.4 疲惫剖析

单击“算理参谋”，创立“新算例2”并挑选“疲惫”为剖析类型，增加“算例一”为新事情，单击“运用、修改疲惫数据”并增加资料的“疲惫SN曲线”，单击“运转”，软件主动剖析核算仿真成果。显现“损坏百分比”和“生命总数”[8]如图5。

3 定论

从图4得出，深沟球轴承在作业中，最大应力应变均首要发生在径向载荷效果线上的沟道上面，故沟道上最易发生损坏。从图5得出，轴承都为蓝色没有太大改动，阐明载荷远小于轴承钢GCr15的疲惫极限，所以能够为轴承在该作业条件下不会被损坏。疲惫剖析成果也阐明晰在实践作业中沟道上最易发生损坏，契合实践状况。

参考文献

[1]张小波，秦天峰，潘振.根据SolidWorks的深沟球轴承的三维建模与仿真剖析[J].现代机械，2016，44,04：43-45.

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[关键词] 欧洲花楸悬浮细胞；酵母提取物；次生代谢产品；机制

[收稿日期] 2013-12-20

[基金项目] 国家自然科学基金项目,81130070，81072989； 国家科技支撑方案项目,2012BAI29B02，2012BAI28B002

[通讯作者] 郭兰萍，Tel：,010 64011944，E-mail： glp01@126. com

[作者简介] 黄蕾，E-mail：

欧洲花楸Sorbus aucuparia L.为蔷薇科苹果亚科花楸属落叶乔木或小乔木，原产欧洲和亚洲西部温带高山区域[1]，其枯燥老练果实可食用和入药[2]。我国花楸属植物50余种，资源丰厚，供药用者约6种[2]。现在研讨发现，苹果亚科植物遭到外界病原菌损害时特异性地发生联苯类化合物作为植保素[3]，Kokubun T等运用铜离子处理欧洲花楸叶片后，能够从叶片中别离出欧花楸素[4]，这种联苯类化合物在健康的植株中并不存在，且其具有广泛的生物活性。欧洲花楸是集药用、食用、园林和生态价值于一身的宝贵树种。

欧洲花楸悬浮细胞,SASC成长速度快、周期短，可作为很好的研讨资料[5]，已有研讨发现用酵母提取物,YE作为诱导子处理可使SASC敏捷组成联苯类化合物[6]。可是，现在这类具有植保素效果的化合物组成机制尚不明晰，还有待进一步的研讨。

本试验以SASC为资料，经过检测YE处理后SASC次生代谢产品的改动及其细胞培育液中pH、可溶性蛋白含量、细胞外Ca2+流等生理生化目标的改动，开端探求YE诱导SASC组成次生代谢产品的机制，尤其是从可溶性蛋白和钙离子2个方面为机制研讨供给了很好的思路和方向，为更深层次地研讨打下根底。

1 资料

欧洲花楸悬浮细胞系由我国科学院植物研讨所叶和春研讨员赠送。

培育箱,Conviron Adaptis CMP6010；超大型摇床,ZYSA0351；电子天平,Sartorius BS 2202S；超净作业台,SW-CJ-2FD型双人单面净化作业台；剖析型酸度计,JENWAY3510；高效液相仪,Waters 2695_2996；UV检测器,T6新世纪19-1650-01-1169；液质联用仪,Agilent 6320 Ion Trap；其他惯例设备。

牛血清蛋白为美国MP公司产品；Yeast extract为OXOID公司产品；其他试剂均为国药集团化学试剂有限公司产品。

2 办法

2.1 细胞悬浮培育系统的树立 诱导出的欧洲花楸愈伤安排接种于含50 mL MS固体培育基的400 mL广口瓶中，愈伤安排每 14 d 继代1次，经过3～5次继代后，挑选疏松的愈伤安排转入液体培育基中培育，每 250 mL 三角瓶中分装 50 mL 的液体培育基，置于25 ℃培育箱中暗培育。悬浮细胞培育转速设定为 120 r・min-1。试验中运用的欧洲花楸悬浮细胞是将减压过滤后的 1.4 g细胞接种于含有 20 mL MS液体培育基的100 mL 三角瓶中。

2.2 YE诱导子的制造及处理 用蒸馏水溶解酵母提取物，制造60 g・L-1的母液，高压灭菌。参照Liu B等处理办法[6]，处理终浓度为3 g・L-1。

2.3 欧洲花楸悬浮细胞中次生代谢产品的提取和检测 将收成的细胞用15 mL甲醇在研钵中研碎，运用滤纸和漏斗将滤液过滤到鸡心瓶中，过滤后的细胞残渣再用10 mL甲醇提取1次，兼并滤液，将鸡心瓶置于旋转蒸腾仪上浓缩至干。培育基用15 mL乙酸乙酯萃取2次，用分液漏斗别离，将乙酸乙酯层倒入提取细胞后的鸡心瓶中，置于旋转蒸腾仪上浓缩至干。用1 mL的乙酸乙酯定容。

将提取液中的乙酸乙酯溶液挥干，用500 μL的色谱甲醇溶解，过0.22 μm的有机滤膜后用于HPLC检测。

HPLC测定条件为：液相色谱柱为Waters Symmetry C18,4.6 mm×150 mm，5 μm；活动相为0.1%甲酸水-甲醇,50∶50流速0.7 mL・min-1；紫外检测波长为280 nm。

质谱条件为：离子源为ESI；正离子方式；雾化气压力206.85 kPa；枯燥气为氮气，枯燥气温度300 ℃，流速10 L・min-1；毛细管电压4 000 V；相对分子质量扫描规模100～600；柱尾分流 2∶1。

2.4 欧洲花楸悬浮细胞生物量测定 将培育的悬浮细胞真空抽滤至不滴水后，直接称量细胞鲜重即为生物量，用鲜重,FW表明，每个处理设置4个生物学重复。

2.5 细胞悬浮液pH测定 选用剖析型酸度计直接测定培育基中的pH，每个处理设置4个生物学重复。

2.6 细胞中可溶性蛋白质含量的测定 用考马斯亮蓝G-250法测定[7]，以牛血清蛋白作规范曲线，单位为mg・g-1,鲜重，每个处理设置4个生物学重复。

2.7 细胞外Ca2+流改动的测定 选用非损害微测技能,NMT[8]，用多聚赖氨酸玻片固定细胞，参加测试液安稳15 min，在显微镜下找到直径约200 μm的细胞簇，测定时刻为10 min，每个处理设置5个生物学重复。

3 成果与剖析

3.1 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞次生代谢产品的影响 细胞经YE处理后，在其细胞提取物中检测到5种联苯类化合物，别离揣度为2′-OH-aucuparin,1，3，5-dihydroxy-biphenyl,2，noraucuparin,3，aucuparin,4，eriobofuran,5。跟着诱导时刻的延伸，SASC组成的联苯类化合物总量呈上升趋势，但5种联苯类化合物在细胞中的含量则别离出现出不同的堆集规则见图1。

化合物1在YE诱导24 h后方可检测到，在48 h时该化合物的含量抵达峰值，跟着诱导时刻的延伸含量逐步削减，可是在156 h时，其含量又出现增加趋势。

化合物2在YE诱导24 h时浓度抵达峰值，在其他检测时刻点上该化合物的含量都较低。

化合物3是YE诱导后最早检测到的化合物，其含量表现出周期性动摇的趋势，12～36 h其含量显着增加，36 h时出现峰值，36～96 h含量又显着下降，108～168 h含量再次缓慢增加。

化合物4含量相对其他化合物较高，在YE诱导24 h之后其含量逐步增加，132 h含量抵达最大值，132～168 h其含量出现缓慢下降趋势。

YE处理后检测到化合物5的时刻最迟，直到36 h该化合物才堆集到必定的浓度。跟着处理时刻的延伸，该化合物的含量呈动摇性增加的趋势，168 h时其含量抵达最大值。

由以上成果可知YE诱导子对SASC组成联苯类化合物的影响是一个动态的改动进程，跟着处理时刻的改动，SASC组成不同的联苯类化合物的组分及其组分间的配比都发生了改动。

3.2 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞生物量的影响 YE对SASC生物量的影响见图2中的实践值，为了解YE诱导后细胞生物量与CK组的改动，根据已得到的SASC成长曲线的拟合函数：f,x =0.369 9/[1+10.77 exp,-0.329 2x][5]。

将取样时刻点代入函数，得到了细胞在正常成长条件下生物量的理论值,图2中的理论值，用得到的理论值减去试验中测得的实践值，得到了理论值和实践值之间的差值,图2中的差值。

在增加YE诱导子后,如图实践值，细胞生物量出现出缓慢的先增加又削减的进程，其改动起伏并不是很显着。在取样时刻段内，细胞生物量改动不大。

剖析理论值、实践值之间的差值，阐明在YE的影响下，SASC增加曲线偏离了细胞增加模型的曲线，YE对SASC的影响全体表现为按捺效果。跟着YE对SASC诱导时刻的增加，YE对SASC的按捺效果也逐步增大。

3.3 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞细胞悬浮液中pH的影响 跟着处理时刻的增加，细胞悬浮液的pH也越来越小。细胞悬浮液的pH改动大致为2个阶梯式下降，见图3。48 h至108 h，pH缓慢下降，在108 h时降至6.445，至此第1阶段完毕；在120 h时细胞悬浮液pH降至6.045，在120 ～168 h，pH处于另一个下降阶段，但下降的起伏较上个阶段要大。

正常细胞培育状况下，细胞悬浮液中的pH跟着培育时刻的延伸而逐步升高[5]。增加YE后细胞悬浮液pH呈显着下降趋势，阐明或许是SASC发生的次生代谢产品导致pH改动，而且这种pH的改动并晦气于细胞的成长。

3.4 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞中可溶性蛋白质的影响 CK组细胞中的可溶性蛋白质含量表现为缓慢下降的改动趋势，见图4。在24，48 h时含量最高，跟着时刻的延伸可溶性蛋白质的含量开端下降，在120，144，168 h 3个时刻点上，可溶性蛋白质的含量相差无几。YE组SASC中可溶性蛋白质的含量出现出缓慢下降，再趋于安稳的趋势。24～96 h细胞中的可溶性蛋白质含量逐步下降，96 h之后细胞中的可溶性蛋白质含量逐步趋于安稳。

将YE组细胞可溶性蛋白含量与CK组做差，得到YE处理后细胞中可溶性蛋白含量的增量，然后与CK组比照得到细胞内可溶性蛋白质的相对增量，见图5。从图中可明晰得出，YE处理后细胞内可溶性蛋白质含量与CK组比照，首要阅历2个阶段，第1个阶段其相对增量大概在50%左右，120 h之后进入第2个阶段，细胞内可溶性蛋白相对增量抵达了140%左右。

3.5 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞外Ca2+流的影响 YE对细胞外Ca2+流的影响，YE组与CK组细胞外Ca2+都表现为内流现象，可是YE组Ca2+流平均值显着小于CK组。从动态流速图中也能够得出，尽管YE组与CK组都是在测定初期Ca2+内流速度较大，跟着测定时刻的延伸速度逐步减小，但YE组速度一直小于CK组。阐明YE处理后导致细胞外Ca2+内流许多削减，见图6。

4 评论

YE处理后SASC提取物中检测到5种联苯类化合物，而正常培育条件下细胞并没有组成这类化合物，阐明细胞组成这类化合物来应对YE诱导子的钳制。一同，跟着处理时刻的延伸细胞培育液中的pH逐步下降，细胞生物量与CK组比增加显着缓慢，阐明SASC在YE钳制下组成的次生代谢产品或许改动了培育液中的pH，导致了细胞的成长条件恶化、影响细胞膜的通透性，使细胞不能正常进行成长、分解、增殖等生命活动，终究导致细胞的生物量下降。

有研讨估测联苯类化合物组成进程中有必定的转化次序[9] ，本研讨发现5种联苯类化合物含量跟着处理时刻的延伸出现不同的堆集规则，全体表现为：1，2，3号化合物处理后12 h即可用现有办法检测到但相对含量较低，而且堆集量敏捷抵达峰值然后下降，揣度这3种化合物或许是联苯类化合物生物组成途径上的上游化合物或中间体；4，5化合物堆集时刻相对较晚，且呈较小动摇的安稳堆集状况，其或许处于组成途径的下流，结构相对安稳。本研讨在必定程度上明晰了联苯类化合物之间存在的转化，为明晰转化次序供给了根据。

YE组细胞中可溶性蛋白质的含量与CK组比照具有显着性差异，在YE诱导下，可溶性蛋白质的相对含量越来越大，最高时相对增量抵达了147.76%，阐明细胞为了反抗真菌带来的损害，对防治机制的投入也越来越多，多组成的可溶性蛋白质或许是初生成长所不需求的，用来调理催化次生代谢产品的组成。

本试验研讨发现YE处理后SASC细胞外Ca2+内流与CK组比照显着削减，阐明在细胞遭到YE诱导子钳制后，Ca2+作为信号分子或许介导细胞组成次生代谢产品的信号转导。

本试验经过剖析生物量、细胞培育液中的pH以及细胞内可溶性蛋白含量的改动，发现YE诱导SASC组成次生代谢产品的机制与道地药材构成的窘境效应的假说[10]根本共同。在不受外界环境钳制的状况下，植物首要满意的是成长和繁衍；在面临不同要素的钳制时，植物会组成次生代谢产品抵挡外界晦气环境，为此需求支付相应的本钱，因而会下降植物的初生成长速度。此外，细胞应对YE钳制敏捷发动了Ca2+信号分子，阐明Ca2+或许介导SASC组成次生代谢产品的信号转导。这些为YE诱导SASC组成次生代谢产品的机制研讨拓宽了思路，为下一步深层次的研讨打下了坚实根底。

[参考文献]

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[3] Kokubun T， Harborne J B. Phytoalexin induction in the sapwood of plants of the Maloideae,Rosaceae biphenyls or dibenzofurans[J]. Phytochemistry， 1995， 40,6：1649.

[4] Kokubun T， Harborne J B. A survey of phytoalexin induction in leaves of the Rosaceae by copper ions[J]. Z Naturforsch， 1994， 49,C：628.

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[8] 印莉萍， 上官宇， 许越. 非损害性扫描离子挑选电极技能及其在高等植物研讨中的运用[J]. 自然科学发展， 2006， 16,3：262.

[9] Hüttner C， Beuerle T， Beerhues L， et al. Differential effect of elicitors on biphenyl and dibenzofuran formation in Sorbus aucuparia cell cultures[J]. J Agric Food Chem， 2010， 58,22：11977.

[10] 黄璐琦， 郭兰萍. 环境钳制下次生代谢产品的堆集及对道地药材构成的影响[J]. 我国中药杂志， 2007， 32,4：277.

Mechanism exploration on synthesis of secondary metabolites in

Sorbus aucuparia cell cultures treated with yeast extract

HUANG Lei， XIAO Wen-juan， YANG Guang， MO Ge， LIN Shu-fang， WU Zhi-gang， GUO Lan-ping

,State Key Laboratory of Dao-di Herbs， National Resource Center of Chinese Materia Medica，

China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China

[Abstract] Suspension cultures cell of Sorbus aucuparia ,SASC was used as materials， the changes of physiological and biochemical indexes of SASC after treatment with yeast extract ,YE were detected， and the synthetic mechanism of secondary metabolites in SASC treated with YE was preliminarily explored. The results were as follows： under the assay conditions， SASC was in